发布时间：2023/12/11 点击数：前言
TILs（Tumor Infiltrating Lymphocytes，肿瘤浸润淋巴细胞）是从肿瘤组织中分离出的浸润淋巴细胞。TILs细胞疗法是指从肿瘤组织中分离肿瘤浸润的淋巴细胞，在体外培养和大量扩增后回输到病人体内的疗法。TILs细胞疗法有力杀伤肿瘤细胞的关键在于从肿瘤组织中获得高活性、高质量的TILs。
从肿瘤组织中分离TILs的方法有机械分离法、酶消化法等，胶原酶是酶消化法中常用的蛋白酶。在本文中小编将向各位小伙伴介绍胶原酶消化法在TILs研究中的应用，并推荐德国Nordmark制造的可在临床上应用的GMP等级胶原酶。
一、Nordmark 胶原酶简介
Nordmark 提供从科研级到临床应用的GMP级胶原酶产品，NB6 GMP级在药物研发和临床试验中得到广fan应用，早在2009年，ChondroCelect成为欧洲shou个ATMP(Advanced Therapy Medicinal Products)药物，而该产品中使用的胶原酶正是Nordmark的Collagenase NB 6 GMP Grade胶原酶。目前已有60+使用Nordmark胶原酶的ATMP研究项目已经在临床阶段，其中21项目是有关TILs研究。
二、应用案例
以头颈癌为例，向各位小伙伴分享胶原酶在TILs提取和分离中应用案例。
1、获取新鲜的头颈癌手术切除组织；
2、用适量体积缓冲溶液清洗组织块表面的血液等；
3、将肿瘤组织剪碎成1~2mm³的组织块；
4、离心收集组织块；
5、用适量体积缓冲溶液清洗剪碎的组织块，重复3次；
6、用适量的胶原酶溶液（1mg/ml）重悬剪碎的组织块；
7、37℃孵育30min；
8、添加足量预冷的缓冲溶液，混匀后离心并收集细胞；
9、用适量体积缓冲溶液重悬细胞，100μm过滤器过滤收集单细胞；
10、CD3、CD4、CD45等表面Marker染色；4℃孵育30min；
11、流式细胞仪分析、筛选，收集目标细胞；
12、TILs培养或冻存。
更多关于Nordmark胶原酶在TILs领域的应用请联系上海77779193永利：
1、超过25年的高质量胶原酶专业供应,按照制药级标准进行纯化和生产；
2、组织细胞解离的整体解决方案:按照不同种属、组织/器官、细胞类型进行分类：
1) 不同规格，纯度，活性的胶原酶以及中性水解酶；
2) 从科研级到GMP等级以及无动物源级别多重选择,相关GMP产品已在FDA备案DMF；
3) 满足绝大多数组织/器官的单细胞解离需求,包括提供敏感细胞解离专用的温和解离酶方案。
3、用户使用友好提供优化过的细胞解离Protocol；
4、供配套的胶原酶残留检测方案敏感细胞解离专用的温和解离酶方案。
