产品简介

LentiBOOST是德国Sirion Biotech 开发的一种效率高、无细胞毒性的LV转导增强剂，用于临床前和临床的LV载体转导。它是一种非离子型、非受体依赖性的表面活性剂，通过降低细胞膜粘稠度、提高脂质交换和跨膜转运，促进LV与细胞膜的融合，提高细胞转导效率。

目前LentiBOOST LV转导增强剂在美国和欧洲已有30多个药物phase III/II/I临床实验中，并有相关药物已上市销售。

产品特点

  1.增强LV转导效率，可高达90%—提高治疗蛋白表达量，有利于取得临床试验成功

  2.减少MOI低至2倍，从而降低COGS（Cost of goods sold）——减少Lentivirus的用量和物料成本

  3.控制单个细胞中的LV载体拷贝数（VCN，Virus Copy Number）——符合FDA/EMA对ATMPs(Advanced Therapy Medicinal Products)产品的安全标准

  4.易于使用——无需改变现有转导流程，兼容已经开发流程

  5.提供研究级和GMP级——GMP级具有临床试验的所有必备文件

  6.30多种应用LentiBOOST的药物已在美国和欧洲进入临床试验（Phase III和Phase I/II）阶段——加速了IND文件归档

注：研究级（phama grade）仅适用于早期研发和工艺优化阶段，不建议临床阶段使用。

  另有GMP garde支持临床申报及商业化生产，货号SB-A-LF-900-01。

作用原理

应用领域

LentiBOOST可应用于多种临床相关细胞类型，包括CD34+造血干细胞（HSCs），间充质干细胞（MSCs），神经干细胞，原代T细胞，NK细胞和成纤维细胞等，对于难转导的小鼠T细胞亦有效。已成为改进体外基因治疗和CAR-T细胞治疗的临床转导方案的理想选择。

客户体验

·LentiBOOST提高LV转导效率

·LentiBOOST无细胞毒性，不影响细胞增殖和分化

·LentiBOOST控制单个细胞中载体拷贝数，符合EMA/FDA对基因改造细胞治疗的安全原则

第1天: 种细胞

参考表格的细胞密度进行种板（注意：如果细胞维持在某种选择压力下，种板时需要去除用于筛选的抗生素，直至维持到第3天 ）

第2天: 病毒转导

总原则：对于第一次实验，建议使用2-30之间的MOIs进行病毒转导（如下实验步骤以MOI 10举例），并将LentiBOOST-P以1：100的标准浓度添加到总体积（培养基+病毒）。

在第二次实验中，建议在1:20-1:1000范围内滴定LentiBOOST-P用量，以确定最小活性浓度。（各组分用量仅供参考，实际最佳转导条件以实验室优化结果为准）

1.4°C复苏慢病毒

2.在细胞中直接加入计算好的LentiBOOST-P体积量，轻轻混匀

3.按下表计算所需慢病毒颗粒用量，并加入细胞培养基中，轻轻混匀

4.Spinoculate（可选）：室温800g离心培养板90分钟（注意: Spinoculation步骤被发现可对大多数细胞增加转导效率。必须使用细胞培养板进行离心，以减少剪切力）

5.正常培养条件过夜培养细胞

第3天: 更换培养基

移除含有病毒颗粒的培养基上清，更换成合适体积的正常培养基

第4天 : 维持培养

如果细胞汇合度较高，可在第四天稀释分板培养，后续按照常规流程进行培养基更换和细胞传代

第5天: 筛选稳定细胞系（可选）

利用LV载体上的抗性筛选标记可筛选出稳定细胞系，事先需要进行杀伤曲线滴定合适的抗生素筛选浓度。（备注: 转导过程中请做好非转导阴性对照）

1.去除细胞中的培养基

2.加入含有一定浓度筛选抗生素的培养基

3.定期更换含有抗生素的培养基并持续培养细胞

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