InvivoGen

InvivoGen产品线包括细胞培养、细胞系、PRR配体、抑制剂、抗体和Elisa试剂、疫苗佐剂、蛋白质、克隆表达、基因和启动子等，可用于免疫疗法、抗体工程、新冠、接种疫苗、炎症等方面的研究。

1、模式识别受体（ pattern recognition receptor,PRR）

先天免疫是一种进化保守的系统，是人体抵御入侵微生物病原体的首道防线。先天免疫细胞表达的模式识别受体 （pattern recognition receptor, PRR） 的激活有助于通过调节内源性过程（如炎症和细胞死亡）来维持体内平衡。PRR配体根据其来源分为三大类：病原体相关分子模式（PAMPs）在微生物中很常见，但在哺乳动物中则不常见;损伤相关分子模式 （DAMP） 是由宿主组织（例如从垂死细胞）释放的分子;芳烃受体配体（AhR配体）的范围从有毒的外源性物质（例如二恶英）到来自宿主或微生物群代谢的膳食化合物。在激动剂检测后，PRR 触发细胞内信号通路，导致参与免疫反应的蛋白质的表达。

在哺乳动物中，PRR包括四类：Toll样受体（Toll-like receptors，TLRs）、RIG-I样受体（retinoic acid-inducible gene-I(RIG-I)-like receptors，RLRs）、Nod样受体（nucleotide oligomerization domain(NOD)-like receptors，NLRs）、C型凝集素受体（C-type lectin receptors，CLRs）和一系列细胞内DNA传感器。

1）Toll样受体

Toll 样受体 （TLR） 是在哺乳动物中发现的模式识别受体 （PRR），并且是迄今为止表征较好的受体。它们启动关键的炎症反应，并塑造适应性免疫。所有 TLR（人类 10 个，小鼠 11 个）都是 I 型跨膜蛋白，其特征是富含细胞外亮氨酸的结构域和细胞质尾巴。它们可识别来自细菌、真菌、寄生虫和病毒的各种病原体相关分子模式 （PAMP），包括脂质基细菌细胞壁成分（如脂多糖 （LPS） 和脂肽）、微生物蛋白成分（如鞭毛蛋白）和核酸（如单链或双链 RNA 和 CpG DNA）。它们还对来自内源性细胞和环境的某些损伤相关分子模式 （DAMP） 做出反应。

InvivoGen 提供TLR报告细胞、TLR配体、抗体、抑制因子、GFP融合基因、配体筛选以及相关基因用于开展TLR信号通路。

2）RIG-I-Like 受体

RIG-I 样受体 （RLR） 构成一个由三个细胞质 RNA 解旋酶组成的家族，这些解旋酶对宿主抗病毒反应至关重要。RIG-I 和 MDA-5 检测双链 RNA （dsRNA），这是 RNA 病毒的复制中间体，导致感染细胞中产生 I 型干扰素 （IFN）。LGP2 包含一个 RNA 结合结构域，但缺少 CARD 结构域，因此充当 RIG-I 和 MDA-5 的负反馈调节因子。

InvivoGen 提供RLR报告细胞、RLR配体、抑制因子以及相关基因用于开展RLR信号通路。

2、细胞培养

InvivoGen 为组织和细胞培养提供支原体检测、选择性抗生素、报告基因检测试剂盒、抗菌剂、细胞转染、转染增强剂以及内毒素检测试剂盒。

1）细胞转染

细胞转染包括将“外来”核酸（如质粒或siRNA）引入细胞中，分别过表达或沉默目标基因。转染允许在各种细胞环境中对特定基因的表达进行功能评估。根据核酸的类型和细胞类型，可以有不同的转染方案，三种主要的转染方法包括化学（如阳离子脂质）、物理（如电穿孔）和生物（如病毒转导）。新引入的核酸可以瞬时存在，即基因仅在有限的时间内表达并且不复制，也可以稳定地存在，即基因整合到受体细胞的基因组中。细胞转染后，基因稳定掺入基因组的一个关键因素是使用适当的选择性抗生素维持细胞培养中的选择压力。

仍然难以转染的细胞，如免疫细胞，通常表达有效的胞质传感器，以检测外来核酸。因此，需要转染增强子或增强剂来禁用这些防御，有助于促进核酸的表达并大大提高转染成功率。

图示：用表达GFP的质粒转染THP-1细胞

InvivoGen 提供转染试剂、转染增强剂、选择性抗生素：

· LyoVec：一种专有的基于阳离子脂质的转染试剂，属于膦酸脂家族。它易于用于多种细胞系的转染，例如人胚胎肾-293（HEK-293）细胞系。

· NATE：一种核酸转染增强剂，可提高瞬时和稳定转染效率。它被设计用于与推荐用于难以转染的细胞（如人单核细胞和小鼠巨噬细胞）的转染试剂和技术（分别为 THP-1 和 RAW 264.7）结合使用。

· 选择性抗生素：一系列高纯度和无内毒素的选择性抗生素，包括玉米蛋白、嘌呤霉素、G418、潮霉素 B Gold 和花霉素。它们可用于哺乳动物和细菌细胞的选择。

2）抗菌剂

细胞培养中的微生物污染是细胞培养的重要步骤。使用受污染的细胞可能会导致灾难性的结果、不可靠的实验、时间损失和资源浪费。微生物污染物，无论是支原体、细菌还是真菌，都可以使用正确的抗生素制剂来避免和消除。

InvivoGen细胞培养物污染预防试剂：

· Normocin：完全预防支原体、细菌和真菌的抗生素制剂;设计用于常规添加到培养的细胞系中

· 原霉素：完全预防支原体、细菌和真菌的抗生素制剂;专为常规添加到原代细胞而设计

· 真菌：用于防止不同形式真菌（酵母、菌丝和霉菌）的抗真菌溶液;专为常规添加到细胞培养物中而设计。 

· 疟原体素预防：用于预防广谱支原体和相关无壁细菌的抗生素制剂;设计用于常规添加到培养的细胞系和原代细胞中。

InvivoGen细胞培养物污染消除试剂：不损伤细胞的情况下可以可靠的、快速的根除污染。

· Normocure：多重耐药除菌剂

· 真菌素：用于去除不同形式的真菌（酵母菌、菌丝和霉菌）的抗真菌溶液。

· Plasmocure：一种二线抗支原体试剂，推荐用于消除似乎对疟原体耐药的支原体。

3、细胞系

InvivoGen提供大量人类和小鼠的细胞系，可用于研究特定基因功能，细胞信号转导通路，筛选PRR的激动剂/拮抗剂，控制细胞毒性基因的表达，筛查有毒蛋白抑制剂，测量细胞因子的产生以及验证抗体功能。此外，还可以通过转录因子报告细胞（NF-κB、IRF 或 NFAT 通路）、PRR报告细胞（TLR，CLR，CDSs和STING，NLR，RLRs，AhR，ALPK1 / TIFA，炎症小体）、细胞因子报告细胞、ADCC以及ADCC检测、免疫检查点细胞检测、自噬报告细胞、COVID-19报告细胞系。

4、抗体

InvivoGen提供针对多种人、小鼠或大鼠蛋白靶标的单克隆抗体，包括细胞因子、PRR、免疫检查点或其他细胞表面标志物。同时，InvivoGen还提供特殊的生物发光 ELISA 试剂盒（LumiKine Xpress 试剂盒），以定量细胞培养上清液、血清和血浆样品中的细胞因子水平。抗体全部通过重组技术在CHO细胞产生或者杂交瘤技术产生，并且经过了功能测试，以满足稳定、可重复和可靠的结果。

5、克隆和表达载体

InvivoGen为不同的应用提供了广泛的克隆和表达载体：

· 用于抗体生成和同种型转换的 pFUSE-CLIg 和 pFUSE-CHIg 质粒

· 用于啮齿动物转基因的pBROAD和pWHERE质粒

· 用于哺乳动物体外和体内基因表达的 pVITRO 和 pVIVO 质粒

· 用于表达标记基因的 pSELECT-Tag 质粒

· 用于同时表达两个基因的pDUO质粒

· pBOOST 和 pVAC 质粒用于疫苗接种目的

· 用于监测PRR激活和细胞因子信号转导的pNiFty诱导报告质粒