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Akura PLUS Hanging Drop System

  • 品牌:InSphero

  • 品名:Akura PLUS Hanging Drop System

  • 型号:CS-PF24

  • 规格:96孔悬滴培养系统(10套/包)

  • 目录价:¥ 19,014.00

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产品简介

InSphero Akura PLUS悬滴系统是一种简单、灵活且能兼容自动化系统的操作平台,用于无支架3D细胞培养、观察和观测。每套InSphero Akura PLUS悬滴系统是由一块InSphero Akura PLUS悬滴板和一块InSphero Akura 96孔细胞微孔板组成。平日里,InSphero将该悬滴系统用于大规模的无支架3D细胞培养、类器官培养和即用型细胞微组织的生产。

 

产品优势

1. 使用InSphero Akura PLUS悬滴板可以形成稳健的包含细胞微球体的悬滴,轻松开展无支架3D细胞培养、类器官培养等工作

2. 包含细胞微球体的悬滴可以方便地转移到InSphero Akura 96孔细胞微孔板中继续培养

3. 细胞微球体在具有特殊设计的InSphero Akura 96孔细胞微孔板中,可以方便地进行长时间的培养、分析和观察


自备材料

1. 实验细胞与合适的培养基

2. 倒置显微镜

3. 细胞计数工具

4. 移液器/自动化液体处理系统

5. 板孔离心机

6. 二氧化碳培养箱(设置为5%浓度二氧化碳,95%相对湿度,37摄氏度)

7. PBS


实验前准备

1. 培养基于37摄氏度预热

2. 用70%乙醇擦拭微孔板的外包装

3. 在无菌操作环境下小心地打开微孔板的外包装

4. 检查InSphero Akura PLUS悬滴系统里的组分是否完整:

(1) InSphero Akura PLUS悬滴板:带有蓄液功能的底板,悬滴板框架,板盖,加湿垫和镊子

(2) InSphero Akura 96孔细胞微孔板:微孔板,板盖


实验步骤



加湿垫准备

1. 准备一个具有蓄液功能的无菌容器(如10cm细胞培养皿),向其中加入20mL的0.5X PBS

2. 取出加湿垫,用镊子夹取加湿垫转入装有PBS的容器中浸泡直至加湿垫完全湿润(此过程约需要5min)

3. 将悬滴板框架从底板中暂时移出,用镊子夹取加湿垫并放置在底板中,放回悬滴板框架


细胞接种和悬滴形成

1. 依据实验设计,将要接种的细胞或细胞混合物制备成单细胞悬液

2. 使用血球计数板或其他合适的细胞计数工具进行细胞计数,并确定合适的细胞接种密度

3. 使用移液器充分吹洗细胞悬液,确保悬液中的细胞均匀分布,并取合适数量的细胞,用培养基将体积补足40uL

* 推荐的细胞接种密度:用于增殖细胞的长期培养,建议使用较低的起始密度,建议每孔接种250-500细胞;用于非增殖细胞的培养或需要快速获得较大体积的细胞微球体,建议每孔接种2500-25000细胞

4. 缓慢地将40uL的细胞液接入悬滴板上对应的培养孔中,在加入液体时要确保吸头尖端与板子间的紧密接触

5. 板盖盖好后转移入二氧化碳培养箱中培养,并定期评估细胞微球体的生长状况。正常情况下,大部分类型的细胞经过4天的培养便可以聚集形成紧密的细胞微球体

* 需注意:在移动InSphero Akura PLUS悬滴板时需要格外当心,以防止悬滴液的滴落而影响实验结果


细胞微球体的转移

* 如需要长期培养细胞微球体,则要将细胞微球体转移入InSphero Akura 96孔细胞微孔板中

InSphero Akura 96孔细胞微孔板的介绍和使用方法请参考相应的使用说明。在开始操作本步骤之前,应该按照要求提前预湿润InSphero Akura 96孔细胞微孔板

1. 将InSphero Akura PLUS悬滴板的悬滴框架小心取下,置于InSphero Akura 96孔细胞微孔板的上方。两者可以通过板框周边的三个针脚确定位置

2. 使用移液器缓慢地向InSphero Akura PLUS悬滴框架的每个孔中加入70uL的培养基,在加入液体时要确保吸头尖端与板子间的紧密接触。加入液体后,悬滴便会落入下方的InSphero Akura 96孔细胞微孔板相应培养孔中

3. 使用倒置显微镜检查每个培养孔中的细胞微球体是否成功转移

4. 将InSphero Akura 96孔细胞微孔板盖好盖子并放入板孔离心机中,250 x g(RCF)离心2min,以帮助去除培养孔内的残留气泡并帮助细胞沉降至培养孔的底部

5. 为了确保每个培养孔中的培养基体积准确,应执行换液操作,吸去培养孔内的所有培养基,然后重新加入70uL的新鲜培养基(遵照InSphero Akura 96孔细胞微孔板的使用说明执行更换培养基的操作)


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