发布时间：2022/03/21
注：我司为Polysciences官方授权中国总代理（申明日期：2024年1月1日）
一、产品介绍
Polysciences公司提供一系列PEI产品：研究级产品PEI MAX和Transporter 5，以及cGMP级MAXgene GMP，提供适合于任何规模AAV、LV病毒载体和重组蛋白制造的成本效益更高、供应可靠且更高质量的转染试剂。
PEI MAX 是一款高浓缩的粉剂，多数科学家选择PEI MAX ，在内部自行制备更低成本、效益更高的转染试剂。多年以来，经过众多业内人士评审的公开研究和出版文献表明，在HEK293、CHO 和 Sf9系统中可获得更高的转染效率，在重组抗体和病毒载体生产中稳定性更高，可靠性更强。PEI MAX是一种非GMP等级转染试剂，适用于基础科学研究及药物研发早期阶段。
PEI MAX 40K 是线性Polyethylenimine，PEI盐酸盐形式，是线性Polyethylenimine PEI 25K的升级产品。相比于PEI25K，PEI MAX 40K ：
· 水解形式（去乙酰化）；
· 盐酸盐形式，具更高的水溶特性；
· 含更长连续性片段，其质子化氮水平比PEI 25K提高11%以上。
Transporter 5转染试剂是一种即用型线性PEI衍生物。由PEI MAX配置而成的即用型无菌试剂，采用0.1μm PES无菌过滤器，可消除支原体污染风险。适用于工艺开发、临床前和早期临床研究，助力过渡到MAXgene用于cGMP生产。
MAXgene GMP (cat# 26406/26435) 是一种cGMP转染试剂，在Polysciences研究等级转染试剂（PEI MAX 或 Transporter 5)的效率和可扩展性基础上增加了验证工艺和监管流流程，适用于细胞和基因治疗病毒载体的研发和生产。
二、产品特点
Polysciences PEI转染试剂优势：
· 更高质量的R&D和cGMP等级产品；
· 更高转染效率，更低细胞毒性；
· MAXgene符合cGMP标准和ISO13485质量管理体系；
· 经过验证的生产工艺；
· 以“全合成”形式，无动物源成分；
· 更高性价比，适用于从早期研发到临床及商业化生产的各个阶段；
· 严格控制批间稳定性；
· 国内外已有多个项目进入临床阶段；
· 具备残留检测方法。
三、使用方法
PEI MAX粉末配置方法：
1) 将1g PEI MAX 40K放入盛有900 mL水的玻璃烧杯中
2) 放入搅拌转子，放置于磁力搅拌器上，设置搅拌程序以形成一个较小的漩涡
3) 等待PEI MAX 40K溶解，通常需要5分钟左右
4) 用25 mL塑料移液管加入1 N NaOH溶液滴定至pH 6.9~7.1
5) 如果不小心超过7.1，则使用1N的盐酸和新的塑料移液管将pH重新滴定至6.9~7.1
6) 将溶液转移到1L玻璃量筒中，加入水定容至1L
7) 用无菌真空过滤膜过滤配制的转染试剂溶液
8) 按需分装，4°C储存
注：未经配制的粉末有效期为2年。
配置成液体后分装在合适的瓶子中，并且保存在4℃的转染试剂将可在6个月之内保持性能，如仅用于蛋白定性研究，分装的转染试剂可延长有效使用期至1年。
四、经过驯化的无血清培养悬浮细胞转染流程
1. 准备工作
转染前2~3小时，种植细胞密度为 1X106/mL 于培养容器中。
2. 转染步骤
（以250 mL摇瓶为例，转染前种植细胞总体积为25mL，最终总培养体积为50mL） ，准备PEI-DNA 转染混合物（按照以下操作顺序）：
1) 在含有2.5mL（25mL 的 10%）稀释液的 EP 管中加入50ug质粒DNA（质粒用量建议在 1~2ug/106细胞之间优化，此处使用1ug/106细胞）
2) 轻轻地混匀/振荡溶液
3) 在DNA溶液中加入50~200uL PEI转染试剂（PEI/DNA 的比例建议在1~4：1之间优化，初次推荐使用2：1或3：1）
4) 涡旋振荡5秒钟
5) 将管子静置于超净工作台10~15分钟，使 PEI-DNA 复合物形成（建议共孵育时间不超过20分钟）
6) 用移液器轻轻上下吹打混合液3次
注：边晃动摇瓶，边将PEI-DNA 混合液加入更换了培养基的转染孔中，确保 PEI-DNA 复合物均匀分布，防止局部浓度过高。
3. 孵育培养
将细胞培养瓶放入培养箱，摇瓶培养2~3小时后，加入25 mL新鲜培养基，继续培养。
通常，在转染后36-48小时可检测到重组蛋白表达或包装的病毒颗粒。转染后72-96小时可观察到更大产量。
五、客户体验
